Spjälkningen är hydrolytisk och resulterar i bildningen av en syra (karboxylsyra, fosforsyra eller svavelsyra) och en alkohol eller en tiol. Exempel på esteraser (med substanser som hydrolyseras inom parentes): lipaser (fetter), fosfolipaser (fosfolipider), kolinesteras (acetylkolin), klorofyllas (klorofyll), fosfataser (fosfatestrar) och sulfataser (sulfatestrar).