Vid gramfärgning behandlas det mikroskopiska utstrykspreparatet i ett första steg med ett blåviolett färgämne, vanligen kristallviolett. Därefter sker betning med jod–jodkalium. Ett avfärgningsmoment med alkohol följs av en kontrastfärgning vanligen med ett rött färgämne, karbolfuksin eller safranin.